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        • 測定小蛋白的分子量超低分子量蛋白maker
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        產品名稱:

        測定小蛋白的分子量超低分子量蛋白maker

        產品品牌: 索萊寶 價格:
        廠商性質: 生產廠家 產品時間: 2016-03-29
        測定小蛋白的分子量超低分子量蛋白maker
        貨號 : PR1300
        規格 : 15T (150 µ1)
        保存 : -20℃保存,有效期為一年。

        產品概述

        測定小蛋白的分子量超低分子量蛋白maker
        貨號 : PR1300
        規格 : 15T (150 µ1)
        保存 : -20℃保存,有效期為一年。


        產品簡介: 
            本產品包含3種多肽和2種低分子量蛋白質組成, 分子量范圍為3. 3kD-20. 1kD。 可以用來判斷SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。本品為蛋白質和多肽混合物的凍干粉,每種蛋白含量約為15-22.5ug,配有一支1×上樣緩沖液。


        使用說明:
            1. 開封后,溶于150 µ1 1×上樣緩沖液,于95℃水浴5分鐘,可根據需要進行小量分裝,每管10 µl,-20℃貯存,每次取一管使用,避免反復凍融。
            2. 使用前取分裝后的小管室溫融化后,95℃預熱5分鐘即可上樣電泳, 用考馬斯亮藍G-250染色后可見5條蛋白帶(見下示意圖) 。


         

        凝膠的配置方法: 

        分離膠分離膠分離膠分離膠夾層膠濃縮膠
         20%/4.5ml16.5%/4.5ml15.5%/4.5ml10%/2ml4%/2ml
        49.5%T 3%C 0.407ml0.160ml
        49.5%T 6%C 1.82ml1.50ml1.395ml
        凝膠緩沖液1.50ml1.50ml1.50ml0.667ml0.496ml
        甘油0.48ml0.48ml0.48ml //
        ddH 2 O0.70ml1.02ml1.125ml0.926ml1.344ml
        10%APS 40µl40µl40µl20µ|20µ|
        TEMED5µl5µl5µl3µl 3µl 


        凝膠制備及染色注意事項: 
            1. 先配制分離膠,聚合后再配制夾層膠,后配制濃縮膠,3種膠的制膠體積比為4:1.5:1。電泳時,30v跑1-2小時后,待指示前沿到達分離膠上沿時,把電壓調100v,電泳結束,整個電泳過程大約需要6-8小時。
            2. 由于多肽所含的氨基酸數目較少,因此如該多肽含有過多的極性氨基酸(堿性或酸性),則會影響其在SDS-PAGE 圖上的條帶遷移率,即其表觀分子量可能和多肽的氨基酸理論推算分子量有一定距離。
            3. 由于 SDS-PAGE 的圖譜上,蛋白質對數分子量和遷移率成正比直線關系的分子量范圍為 15,000-200,000因此對于分子量小于 10000 的蛋白質或多肽的分子量,只能根據標準分子量進行估計,推斷其是否落入預測的分子量范圍。
            4. 由于超低分子量多肽(3000 及 3000 以下) ,極易從凝膠上浸出,因此染色及脫色時間不宜太長,脫色后凝膠也不宜在水中浸泡保存過久,否則條帶會消失。
            5. 電泳之后可將膠置于固定液中固定20分鐘,再進行染色,能得到較好的蛋白條帶;如時間不允許,也可不進行固定直接染色。 如果使用配方7進行染色時效果不好或考慮其毒性, 請選擇本公司的考馬斯亮藍蛋白膠快速染色液(貨號:P1300),該產品具有染色快,無毒,靈敏性高等特點,是常規染色液的替代品。


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        T1070 5×Tris- 甘氨酸電泳緩沖液
        P1300-500  考馬斯亮藍快速染色


        附: 小分子蛋白質SDS-PAGE 電泳試劑配制
        1. 49.5% T 3 % C (配制夾層膠和濃縮膠)
        丙烯酰胺 48g
        甲叉雙丙烯酰胺 1.5g
        用ddH 2 0溶解后定容100ml
        2. 49. 5 % T 6 % C (配制分離膠)
        丙烯酰胺 46. 5g
        甲叉雙丙烯酰胺 3. 0g
        用ddH 2 0溶解后定容100ml
        3. 凝膠緩沖液
        Tris堿 182g
        ddH 2 0 300ml
        用HCl調節pH值8.45
        用ddH 2 0定容 500ml
        再加入SDS 1.5g
        4 . 10×陽極緩沖液(下槽緩沖液〕
        Tris堿 121. 1 g
        ddH 2 0 400ml
        用HCl調pH值8.9
        用ddH 2 0定容 500ml
        5. 陰極緩沖液(上槽緩沖液)
        Tris堿 12 .11g
        Tricine 17.92g
        SDS 1g
        用ddH 2 0定容1000ml
        此溶液不用調節pH值
        6. 固定液
        0.5% 戊二醛
        30% 乙醇
        用ddH 2 0定容100ml
        7. 染色液
        50% 甲醇
        10% 乙酸
        0.2% 考馬斯亮藍G-250
        用ddH 2 0定容500ml

         

        測定小蛋白的分子量超低分子量蛋白maker訂購說明:

        1、絕大部分產品備有現貨,一般情況下都能訂貨當日發貨。 
        2、部分非常用產品,需提前1-2日預訂,海外期貨則需要提前3-6周預訂。 
        3、部分產品價格會因貨期、批次等因素發生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。 
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        運輸說明:

        1、極低溫產品:極低溫產品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
        2、低溫產品:低溫產品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產品的性質穩定如一,為您的實驗保駕護航。
        3、常溫產品:常溫產品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產品由公司庫房人員快速配貨,準確快速高效的快遞保證產品快速送達您的手中。

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